Abstrak
Analisis kuantifikasi asam nukleat (NQA) yang akurat sangat penting untuk pengobatan dan pencegahan penyakit. Namun, metode NQA digital yang ada sering kali tidak memiliki otomatisasi dan kecepatan yang memadai. Dalam studi ini, kami memperkenalkan metode amplifikasi polimerase rekombinase digital tetesan berbasis mikrofluida digital matriks aktif yang cepat dan otomatis (AM-DMF-ddRPA). Metode ini dapat mengukur virus influenza A dan B (IAV dan IBV) hanya dalam waktu 60 menit, yang mencakup seluruh alur kerja dari ekstraksi asam nukleat hingga amplifikasi digital, deteksi fluoresensi, dan analisis statistik. Kami membuat chip AM-DMF yang dilengkapi dengan elektroda throughput tinggi dan mengoptimalkan logika kontrolnya. Dengan memanfaatkan algoritma navigasi tetesan kecerdasan buatan, kami berhasil mencapai operasi gerakan dan pencampuran tetesan throughput tinggi (4608 tetesan, masing-masing dengan volume 0,9 nL). Sistem RPA target ganda dirancang untuk mendeteksi IAV dan IBV, dan kinerja deteksinya disetel dengan baik. Eksperimen yang dilakukan dengan sampel klinis mengungkapkan bahwa metode ini menunjukkan sensitivitas yang sangat tinggi untuk deteksi molekul tunggal, dengan batas deteksi 1,69 salinan per reaksi, dan mencapai 100% kesesuaian dengan hasil qPCR. Teknologi kuantifikasi yang inovatif ini memiliki potensi luar biasa untuk memajukan diagnosis penyakit, pengobatan, dan penelitian mendasar.
AM-DMF-ddRPA: Platform Mikrofluida Digital Lengkap untuk Analisis Asam Nukleat Digital yang Cepat dan Otomatis
